Diabetes Mellitus: Terapia con Stem cells

La producción de células productoras de insulina in vitro y un nuevo protocolo para la producción de las células, lo que representa otra fuente celular potencial para una terapia celular en diabetes.

La población de células PEC-01, diferenciados a partir de Stem cells embrionarias humanas (hESCs), contiene progenitores pancreáticos (PP) que, cuando se carga en dispositivos de macroencapsulación (para producir el producto candidato VC-01) y se trasplantaron en ratones, pueden madurar en células secretoras de insulina sensibles y otras células endocrinas pancreáticas que participan en el metabolismo de la glucosa lo que resultaría una nueva alternativa para el tratamiento de DM1.

Referencias Bibliográficas:

1.    Insulin-Producing Endocrine Cells Differentiated In Vitro From Human Embryonic Stem Cells Function in Macroencapsulation Devices In Vivo(2016):

http://stemcellstm.alphamedpress.org/content/4/10/1214.full

Diabetes Mellitus: Animal Transgénico

Gremlin es una glicoproteína que actúa como regulador de las BMPs y como mediador de TGF-β en la vía de señalización TGF-β/Smad. Se ha descrito alta expresión de Gremlin en biopsias de pacientes con nefropatía diabética. 
Con el fin de estudiar el rol in vivo de Gremlin en el desarrollo de fibrosis y daño renal diabético, se indujo diabetes experimental en ratones transgénicos (TG) que sobre-expresan Gremlin humano (GREM1) en células del túbulo proximal. 

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1.    A. Marchant. Desarrollo de un modelo de nefropatía diabética en un transgénico murino que sobre-expresa gremlin humano. (2014). Disponible en:

http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2014/fcm315d/doc/fcm315d.pdf  

Diabetes Mellitus: ADN Recombinante.

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

Es el que se genera de manera biológica dentro de los organismos, como, por ejemplo, en la fecundación del óvulo por el espermatozoide.

ADN RECOMBINANTE EN DIABETES MELLITUS

El hEGF recombinante (EGFhr) (beta-urogastrona) ha sido desarrollado utilizando la tecnología recombinante de ácido desoxirribonucleico (ADN),  para la aplicación terapéutica en el tratamiento de  úlceras en los grados 1 y 2 en la escala de wagner del pie diabético.

En un estudio, un total de 50 pacientes con úlceras de pie diabético, se incluyeron, resultando con la curación completa de la úlcera al cabo de 8 semanas de tratamiento.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1.    Efficacy of topical application of beta urogastrone (recombinant human epidermal growth factor) in Wagner's Grade 1 and 2 diabetic foot ulcers: Comparative analysis of 50 patients.(2014)

http://www.jnsbm.org/article.asp?issn=0976-9668;year=2014;volume=5;issue=2;spage=273;epage=277;aulast=Singla;type=3

2.    Recombinant DNA Applications(2015):

http://www.news-medical.net/life-sciences/Recombinant-DNA-Applications.aspx

Diabetes Mellitus: Técnica molecular alternativa

Western Blott para determinar  la insulina y la señalización AMPK.

Se lisaron muestras de tejido congelado y células aisladas / cultivadas en tampón de lisis RIPA modificado. Las muestras se separaron en geles de dodecilsulfato sódico-poliacrilamida al 8-10% y luego se transfirieron a membranas de fluoruro de polivinilideno.

Las membranas se bloquearon con leche sin grasa al 5% en Trisbuffered de solución salina con Tween 20 al 0,1% durante 1 h a temperatura ambiente y después se sondearon durante la noche a 4ºC con anticuerpos primarios, seguido de incubación con fosfatasa alcalina conjugada secundaria a anticuerpo durante 1 h a temperatura ambiente.

Las membranas se desarrollaron con un reactivo de quimi – fluorescencia y fueron escaneados por el sensor de imágenes Storm 860 (GE, Healthcare, Piscataway, NJ).

 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Western blotting to determine inflammatory, insulin and AMPK signaling (2012).

http://diabetes.diabetesjournals.org/content/diabetes/suppl/2012/07/19/db11-1373.DC1/DB111373SupplementaryData.pdf

Diabetes Mellitus: PCR

                                                                                                                                                             

Tema: El aumento de expresión de TLR9 asociado con S100A8 proinflamatoria y la IL-8 en las heridas diabéticas.

Objetivo: Demostrar la implicación del aumento de TLR9 en la inflamación sin resolver en diabetes mellitus tipo 2 (DM2) casos con alteración de la cicatrización de la herida.

Muestra: Muestras de la herida y las células mononucleares de sangre periférica

Tipo de Ácido Nucleico: ARNm

EXTRACCIÓN: Shock térmico 

Gen a amplificar: TLR9, S100A8 y IL-8

Tipo de PCR: RT-PCR

 Desnaturalización:                94°C          5 minutos

 Hibridación:                           58°C          40 segundos

 Extensión:                             72°C          10 minutos                  

30 CICLOS 

Visualización: EFO

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Increased expression of TLR9 associated with pro-inflammatory S100A8 and IL-8 in diabetic wounds could lead to unresolved inflammation in type 2 diabetes mellitus (T2DM) cases with impaired wound healing. (2016)

https://www.clinicalkey.es/#!/content/playContent/1-s2.0-S105687271500392X?returnurl=http:%2F%2Flinkinghub.elsevier.com%2Fretrieve%2Fpii%2FS105687271500392X%3Fshowall%3Dtrue&referrer=https:%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2F

Diabetes Mellitus: Pruebas de Tamizaje.

Tamizaje Neonatal

El tamiz neonatal es una prueba que se realiza a los recién nacidos mediante la toma de unas pocas gotas de sangre del talón, este procedimiento se lo lo puede realizar hasta 30 dias despues del nacimiento  para detectar las alteraciones en el metabolismo y así evitar que se llegue a desarrollar el retraso mental o la muerte. Detecta enfermedades congénitas, antes de que éstas se manifiesten con la finalidad de poder iniciar el tratamiento adecuado para que se disminuya el problema.

Referencias Bibliográficas

Tamiz Neonatal una herramienta segura para prevenir el Hipotiroidismo Congénito. 2015. Disponible en:

http://www.utm.mx/edi_anteriores/temas55/T55_1E4_Tamiz%20Neonatal.pdf

PRUEBA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA (PTGO):

Se la realiza con una carga que contenga el equivalente a 75 g de glucosa anhidra, diluidos en 300 mL de agua, a temperatura ambiente, ingeridos en un periodo no mayor de cinco minutos. La PTGO se considera el estándar para la confirmación de la diabetes en caso de duda. Indicaciones:

Referencias Bibliográficas

Definición, clasificación y diagnóstico de la diabetes mellitus. 2012. Disponible en:

http://www.saber.ula.ve/bitstream/123456789/36728/1/articulo2.pdf

Diabetes Mellitus: Alteraciones Epigenéticas

Muchos factores maternos durante el embarazo puede aumentar el riesgo de que sus crías desarrollen diabetes en su vida posterior (desnutrición, la hiperglucemia, la obesidad, fumar, beber, ingesta de comida chatarra, la administración de hormonas, e incluso el estrés.

La reducción en la acetilación de histonas y el aumento de la metilación en la región promotora del gen Pdx1 reduce la expresión de este gen, necesario para codificar un importante factor de transcripción para la función de las células β de páncreas.

Se ha demostrado que el ejercicio modifica la metilación de un promotor en el ADN (PGC1α) para favorecer la expresión del gen responsable de la biogénesis y la función mitocondrial. Por lo tanto atenúa modificaciones epigenéticas inducidos por dietas de alta energía y conduce a la demora de tipo 2 de inicio diabética. 

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

1   1. Epigenetics and diabetes mellitus. (2016). Disponible en:

h       http://www.esim.eg.net/temp/EgyptJInternMed28239-6484647_180046.pdf

http://www.esim.eg.net/article.asp?issn=1110-7782;year=2016;volume=28;issue=2;spage=39;epage=51;aulast=Rehan

Diabetes Mellitus: Alteraciones en la Traducción

Investigadores descubrieron que el gen CDKAL1 parece tener un efecto global sobre la producción de proteínas asegurando la correcta traducción. Ellos derogaron el CDKAL1 en las células beta de los ratones y se observó una respuesta de insulina disminuida a una inyección intra-peritoneal de glucosa. Estos eventos se exacerbaron en ratones que fueron alimentados con una dieta alta en grasas durante varias semanas confirmando así su influencia en el desarrollo de la diabetes mellitus.El Antígeno humano HuD  en las células B pancreáticas que disminuye la traducción de Ins2 (preproinsulina).

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1  1. Beta-Cell Failure, Stress, and Type 2 Diabetes. (2013). Disponible en:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3684425/pdf/nihms459262.pdf

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3684425/

1  2. RNA-binding protein HuD controls insulin translation. (2012). Disponible en:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3319250/pdf/nihms-353779.pdf

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3319250/

Diabetes Mellitus: Alteraciones en la transcripción

Los programas de expresión génica de las células pancreáticas parecen ser controlados por un pequeño conjunto de factores pancreáticos de transcripción clave, incluyendo HNF1α, HNF1β, HNF4α, PDX1 y NeuroD1, las mutaciones en cualquiera de estos factores pueden dar lugar a diversas formas de diabetes. Estas mutaciones tienen un efecto perjudicial sobre el sistema de circuitos auto regulatorios interconectados formado por estos factores y sus genes diana.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1.     Transcriptional Regulation and its Misregulation in Disease (2013). Disponible en:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3640494/pdf/nihms459313.pdf

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3640494/

Diabetes Mellitus: Alteraciones en la replicación.

En un estudio  sobre el control de DM se extirpó tejidos de aleta del pez cebra de experimentación, donde se analizó la muestra por secuenciación MeDIP  y  técnicas de microarrays, se encontró, de acuerdo a los resultados del análisis bioinformatico que varios genes implicados en la replicación y metabolismo del ADN (apex1, MCM2, MCM4, orc3, LIG1, y Dnmt1) se encuentran alterados en el estado de Diabetes mellitus.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1 1.  Epigenetic studies point to dna replication/repair genes as a basis for the heritable nature of long term complications in diabetes. (2016). Disponible en:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4769771/pdf/JDR2016-2860780.pdf

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26981540

Diabetes Mellitus

La diabetes mellitus es un grupo de alteraciones metabólicas que se caracteriza por hiperglucemia crónica, debida a un defecto en la secreción de la insulina, a un defecto en la acción de la misma, o a ambas. Además de la hiperglucemia, coexisten alteraciones en el metabolismo de las grasas y de las proteínas. La hiperglucemia sostenida en el tiempo se asocia con daño, disfunción y falla de varios órganos y sistemas, especialmente riñones, ojos, nervios, corazón y vasos sanguíneos.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1.     Definición, clasificación y diagnóstico de la diabetes mellitus. (2012) Disponible en :

http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=375540232003

El Inicio

Sean Bienvenidos a este Blog, que tiene como fin, el registrar y documentar mi experiencia en el estudio de la Biología Molecular, materia que me encuentro cursando como parte de mi formación como médico.Tiene mi agrado ya que esta materia toma como punto de partida a biomoleculas primitivas en el origen de la vida, tema que considero demasiado genial e interesante. Les invito a acompañarme en este periodo de estudio. Comenzamos.